САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

10.3.4. Витамины

Витамин В₆ (пиридоксин) и два родственных соединения (пиридоксамин, пири­доксаль; 4-дезоксипиридоксин в качестве внутреннего стандарта) выделили из свинины и разделили при 30°С на колонке С_!8 (/-_вотб = 290 нм, Х_п, = 395 нм) элюи­рованием 0,01 М водным раствором H₂S0₄ [1582]. Полное элюирование заняло 15 мин, форма пиков была превосходной. Привели таблицу, иллюстрирующую влияние изменения концентрации серной кислоты на время удерживания. Полу­чили линейные диапазоны 0,0015-0,8 мкг/мл.

Определяли содержание аскорбиновой и дегидроаскорбиновой кислот в плазме. Использовали колонку С]₈ (кулонометрический детектор при 100 мВ) и 100 мМ водный раствор Na₂HP0₄ с 2,5 мМ раствором ЭДТА и 2 мМ раствором хлорида н-додецилтриметиламмония (рН 3) в качестве подвижной фазы [1583]. Аскорбиновая кислота элюировалась меньше чем при 5 мин. Дегидроаскорби- новую кислоту определили посредством ее восстановления до аскорбиновой кислоты дитиотреитолом. Содержание дегидроаскорбиновой кислоты получали путем вычитания исходного содержания аскорбиновой кислоты из ее содержа­ния в восстановленной пробе. Легко детектировали введение 1 нг.

Аскорбиновую кислоту (АК, витамин С), дегидроаскорбиновую кислоту (ДАК), изоаскорбиновую кислоту (ИАК) и дегидроизоаскорбиновую кислоту (ДИАК) экстрагировали из пищевых продуктов и определили при 20°С на колон­ке С is (X = 247 нм для АК и ИАК, послеколоночная дериватизация О-фенилендиа- мином и затем л_вотб = 350 нм, Х_п, = 430 нм). В качестве подвижной фазы использо­вали 2,5 мМ водный раствор хлорида додецилтриметиламмония с 2,5 мМ раство­ром Ка₂ЭДТА и 66 мМ фосфатным и 20 мМ ацетатным буферами при рН 4,5 [1584]. Полное элюирование заняло 9 мин, пики были хорошо разрешены. Диапа­зоны концентраций составили 10—150 мкг/мл для АК и 1—50 мкг/мл для ДИАК.

Пиридоксин, пиридоксаль, пиридоксамин, пиридоксальфосфат и пиридокса- минфосфат экстрагировали из вареных сосисок и разделили при 35°С на колон­ке Cig с дезактивированной основой (Х_нт6 = 290 нм, Я_эм = 395 нм) элюированием подвижной фазой вода (50 мМ буфер КН₂Р0₄ при рН 3,2)/ацетонитрил в объем­ном отношении 99:1 [1585]. Полное элюирование заняло 4 мин, достигли очень хорошего разрешения при хорошей форме пиков. Получили линейные диапазо­ны 10-500 мкг на введенное количество и пределы обнаружения 0,02-0,5 мг/100 г пробы (в зависимости от определяемого соединения).

Пиридоксин (витамин В₆), пять витамеров (пиридоксаль, пиридоксамин и три соответствующих 5'-фосфатных эфира) и метаболит 4-пиридоксиновую кислоту выделили из хлебопекарных дрожжей, яиц и молока [1586]. Разделение осуществили на колонке С_!8 (Х_в03б = 290 нм, Х,_п, = 389 нм [многопроходный отрез­ной фильтр]) элюированием 0,15 М водным раствором NaH₂P0₄ при рН 2,5 с 70%-ным раствором НС10₄. В ходе элюирования, занявшего 20 мин, получили пики очень хорошей формы и хорошее разрешение. Вводимые количества изме­нялись в диапазоне от 15 до 150 пмоль.