САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

3. Регулярно заменяют подвижную фазу свежеприготовленной.

Второй способ применяют редко. Третий способ обычно наиболее дорого­стоящий, поскольку требуется больший объем подвижной фазы по сравнению с альтернативными способами 1 и 2.

Растворители, которые содержат буферы или модификаторы, приготовлен­ные из твердых веществ, надо фильтровать перед использованием. Для улучше­ния воспроизводимости буферные растворы следует готовить отдельно как ин­дивидуальные компоненты подвижной фазы и затем отдельно фильтровать. На­пример, если подвижная фаза имеет состав метанол/вода (50 мМ буфер ацетата натрия при рН 4,5) в объемном отношении 50:50, ацетатный буфер надо приго­товить отдельно и затем соединить с метанолом. Избегайте приведения к опре­деленному значению рН в неводных растворителях, поскольку рН-метр измеря­ет активность ионов водорода только в водном растворе!

Далее, профильтровав растворитель, помните, что под вакуумом потеря наибо­лее летучего компонента будет наибольшей. Это важно, когда один из компонен­тов буфера значительно более летучий, чем другой (например, уксусная кислота и ацетат натрия). Поэтому не оставляйте профильтрованный растворитель в фильтре под вакуумом на длительный период, когда процесс фильтрования закончен.

Отметьте, что наиболее высокочистые растворители для ВЭЖХ не требуют фильтрования перед использованием, если к ним не добавляют твердый моди­фикатор. Фактически, даже самая лучшая фильтрационная среда содержит мно­жество частиц и часто вносит их в растворитель в большем количестве, чем изначально в нем содержится. Более того, из-за способа изготовления фильтра­ционной среды всегда есть риск, что профильтрованный растворитель будет эк­страгировать компоненты (это верно в случае фильтров, совместимых с раство­рителем), которые затем проявятся на градиентной хроматограмме в виде «неи- дентифицируемых» пиков. Эти пики практически всегда ошибочно относят на счет примесей в органическом растворителе. Чтобы избежать этих проблем, во-первых, следует убедиться, что выбранный фильтр совместим с растворите­лем, нуждающимся в фильтровании, и, во-вторых, приобретайте предваритель­но очищенные фильтры, если это возможно.

Следует отметить, что значение рН воды, очищаемой до высокой степени чистоты, может отличаться от значения рН, при котором в итоге эту воду испо­льзуют. Это связано с тем, что водорастворимые компоненты стекла будут изме­нять ее рН. Значение рН обычной высокочистой воды близко к 7,0. Вода, храня­щаяся в боросиликатном стекле, может иметь рН > 8. Следует заметить, что этот уровень может быть существенным при работе с ион-парными реагентами в не­больших количествах и для ионообменной хроматографии. Для воды, чистота которой устанавливается ACS (Американским Химическим Обществом), стек­лянная упаковка наименее приемлема, поскольку ACS-тест также регламенти­рует содержание в воде силиката. Однако, с чисто функциональной точки зре­ния, силикатный тест не оказывает влияния на существенные для ВЭЖХ харак­теристики воды.