САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Алли и Парк [1195] определяли креатин, фосфокреатин, четыре пуриновых основания (например, ксантин, аденозин) и семь нуклеотидов (например, ИМФ, ГТФ, АТФ) в экстрактах сердечных тканей на колонке С₁₈ (^ = 210 нм до 5 мин для мониторинга креатина и фосфо креатина, затем с переключением на 254 нм) посредством 22-минутного градиентного элюирования подвижной фазой ацето­нитрил/вода (буфер 35 мМ КН₂Р0₄ с 6 мМ сульфатом тетрабутиламмония и 125 мМ ЭДТА при рН 6,0) в объемном отношении 0:100 —> 50:50. Авторы отме­тили, что в связи с большим сдвигом нулевой линии в ходе градиентного элюи­рования длину волны 210 нм нельзя было использовать на всем его протяжении, поэтому длину волны переключили на 254 нм. Этот факт можно соотнести с применением сульфата в подвижной фазе. Фосфат тетрабутиламмония мог бы обеспечить более низкий фон. Авторы также отметили, что данным методом можно разделить NAD и NADP (А = 340 нм). Приведенные концентрации соста­вили от 0,1 до 9 мкмоль/г ткани.

Ряд полифосфатов диаденозина (от дифосфата диаденозина до гексафосфата диаденозина) экстрагировали из тромбоцитов и полностью разделили при 22°С на аффинной колонке (А = 254 нм) посредством сложного 15-минутного гради­ентного элюирования подвижной фазой вода (10 мМ буфер К2НРО4 с 2 мМ гид­рофосфатом тетрабутиламмония при рН 6,8)/(вода/ацетонитрил 20:80) в объем­ном отношении 100:0 —> 50:50 [1196]. Легко детектировали пики стандартных образцов, содержащих 100 нг каждого компонента.

2,3'-Дидезоксиаденозин (ддА) и 2,3'-дидезоксиинозин (ддИ) в пробах плаз­мы отделили от мочевой кислоты и гипоксантина на колонке С₁₈ (А = 254 нм) пу­тем сложного 15-минутного градиентного элюирования подвижной фазой Ы,К-диметилформамид/вода (20 мМ раствор NH4H2PO4 с 5 мМ раствором фос­фата тетрабутиламмония при рН 6,8) в объемном отношении 0:100 —> 10:90 (при 10 мин, выдерживали 10 мин) [1197]. Элюирование проб, экстрагированных из плазмы, заняло 20 мин (внутренний стандарт, ]Ч-метил-2'-дезоксиаденозин, элюировался последним). Легко детектировали пики при введении 500 нг. Полу­чили пределы обнаружения 10 нг за одно введение пробы или 0,2 мкг/мл в плаз­ме. Разделение ддА и ддИ осуществили на той же колонке с использованием в качестве изократической подвижной фазы 7,5% раствора М,М-диметилформа- мида в буфере (10 мМ буфер NH₄H₂P0₄ при рН 6,8).

Конъюгаты ДНК с внедренным ионом металла ([11и³⁺][9,10-фенантронхинон- диимин]₂[4-масляная кислота-4'-метилбипиридил]-ДНК, где ДНК представляет собой олигомер из 20 нуклеотидов), присоединенные к концевым группам 5' или 3', синтезировали и разделили на колонке С_1К (л = 260 нм или 390 нм). Полное элюирование подвижной фазой вода (50 мМ буфер ацетата аммония при рН 6)/ацетонитрил в объемном отношении 50:50 с полным разрешением заняло 35 мин [1198].