САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Двадцать три биоактивных олигопептида, имеющие в составе от 4 до 18 ами­нокислот (например, лейкокинин II, фибринопептид, ангиотензин II, АСТН 1-10, нейростатин, tyr-соматостатин), изучали на микропористой колонке Cis (электрохимический детектор при +0,88 и 0,5 В относительно Ag/AgCl) путем сложного 60-минутного градиентного элюирования подвижной фазой ацетонит­рил/ИПС/вода [0,1% ТФК] 3:97) в объемном отношении 0:100 60:40 [1311]. Авторы отметили, что ИПС добавили с целью уменьшить время возвращения системы к состоянию равновесия. После прохождения колонки к элюенту до­бавляли различные буферные растворы и Cu(II) (в концентрации, в 500 раз пре­вышающей концентрацию определяемого соединения). Получили линейный диапазон от 0,5 до 100 пмоль.

9.6.3. Белки

Ацетонитрил оказывает комплексное влияние на удерживание белков. Он, как и бо­льшинство органических растворителей, обусловливает денатурацию белков, что приводит к сложным и иногда непредсказуемым хроматографическим результатам, которые еще более усложняются с применением градиентного элюирования.

Фактор эпидермального роста (ФЭР) обработали лизилэндопептидазой для получения дез-ВЗО-инсулина. Эти соединения разделили на колонке Cis (к = 220 нм) путем 35-минутного градиентного элюирования подвижной фазой вода/ацетонитрил с 1% ТФК в объемном отношении 75:25 —» 40:60 [1312]. ФЭР элюировался приблизительно при 16 мин, а инсулин — при 10 мин. Пики имели превосходную форму.

Металлофермент супероксиддисмутазу из экстракта грибков очистили ионооб­менным методом и определили на колонке Cis (к = 214 нм) путем 60-минутного гра­диентного элюирования подвижной фазой вода/ацетонитрил/ТФК в объемном от­ношении 99:1:0,08 —> 20:80:0,08 [1313]. Элюирование дисмутазы завершилось по­сле 35 мин, таким образом, продолжительность градиентного элюирования можно значительно сократить с целью уменьшения общего времени анализа.

Куриные холецистокинины 8 и 9 экстрагировали из кишечника и очистили методами эксклюзионной и обращенно-фазовой ВЭЖХ на колонке Cig. По­следний шаг анализа включал проведение 45-минутного градиентного элюи­рования подвижной фазой вода/ацетонитрил/ТФК в объемном отношении 95:5:0,1 —> 55:45:0,1 на колонке С₈ (А, = 214 нм) [1314]. Достигли полного разре­шения и превосходной формы пиков.

Инсулин экстрагировали из плазмы и определили на колонке Cig (к = 214 нм) элюированием подвижной фазой вода (0,2 М Na₂S0₄ до pH 2,3 с Н₃Р0₄)/ацето- нитрил в объемном отношении 74:26 [1315]. Полное элюирование заняло мень­ше 10 мин, пики имели превосходную форму. Привели градуировочную кривую в диапазоне от 100 до 800 мкМЕ/мл.