САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

9.6.2. Пептиды

В превосходной работе [1284] Йошида и сотр. изучали характеристики удержива­ния 100 пептидов (от димеров аминокислот до пептидов, составленных из 31 ами­нокислоты) при 40°С на трех колонках: амидной, диольной и кварцевой (А, = 215 нм). В каждом случае проводили 58-минутное градиентное элюирование по­движной фазой ацетонитрил/вода/ТФК/триэтиламин в объемном отношении 90:10:0,2:0,2—» 45:55:0,2:0,2. Времена удерживания изменялись в диапазоне от меньших 1 мин до 40 мин. Отметьте, что градиент является возрастающим по со­держанию воды. Это существенное отличие от традиционного подхода к обра- щенно-фазовым разделениям.

Изучали окисление N-концевых серил- и треонилгексапептидов периодатом и скорость последующей циклизации. При первом разделении полностью разре­шили немодифицированный пептид из гидратированного глиоксилилпептида и его альдегидный аналог. Путем градиентного элюирования подвижной фазой вода (0,1% (масс./об.) ТФК)/ацетонитрил в объемном отношении 100:0 (выдер­живали 5 мин) —» 80:20 (при 25 мин) на колонке Q₈ (А, = 229 нм) получили пики отличной формы [1285]. Мониторинг оксимной циклизации проводили с испо­льзованием градиентного элюирования с начальным составом подвижной фазы 100% воды (0,1% (масс./об.) ТФК) с удерживанием в течение 5 мин, а затем пе­реходом к 1,17% ацетонитрила в течение 40 мин (X = 214 нм). Форма пиков и раз­решение также были превосходными.

Экстракты кожи и выделений лягушки Rana grylio выделили, очистили и проанализировали на содержание пептидов. Обнаружили восемь потенциаль­ных антимикробных и вазорелаксантных пептидов (темпорины IGa, 1Gb, lGc, lGd; ранатуерины IGa, 1Gb; раналексины IG, 2G). Начальную очистку провели на колонке С₁₈ (X = 214 нм) путем градиентного элюирования подвижной фазой вода (0,1% ТФК)/ацетонитрил в объемном отношении 100:0—»79:21 (при Юмин) —» 51:49(при70мин) —» 30:70(при71 мин,выдерживали 19мин)[1286]. Конечную очистку провели на колонке Сд путем 40-минутного линейного гради­ентного элюирования подвижной фазой вода (0,1% ТФК)/ацетонитрил в объем­ном отношении 70:30 —» 45:55. Из приблизительно 100 г кожи получили от 35 до 210 нмоль каждого из четырех пептидов (всего 480 нмоль).

Галанин (пептид из 29 аминокислот) и скилиоринин I (пептид из 10 амино­кислот) выделили из осетрины и фракционировали на полупрепаративной ко­лонке С₁₈ (X = 280 нм) путем градиентного элюирования подвижной фазой вода (0,1% ТФК)/ацетонитрил в объемном отношении 100:0 —»79:21 (при 10 мин, выдерживали 30 мин) —»51:49 (при 100 мин) [1287]. Собранную фракцию затем подвергли дальнейшей очистке посредством последовательного процесса вве­дения/сбора фракций на аналитической колонке С₄, фенильной колонке и, нако­нец, на колонке Ci₈ (X = 214 нм). На каждой колонке проводили 45-минутное гра­диентное элюирование подвижной фазой вода/ацетонитрил/ТФК в объемном отношении 929:70:1 -» 719:280:1.