САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

4.6.4. Заключение

На начальных этапах разделения белков и пептидов широко и эффективно испо­льзовали метанол, этанол, ИПС [487] и н-пропиловый спирт. Поскольку потребо­вались более низкие УФ границы прозрачности, диапазон прозрачности спиртов 205-210 нм стал неприемлем. И хотя спирты меньше, чем другие растворители, склонны вызывать денатурацию белков, остался единственный органический об- ращенно-фазовый растворитель - ацетонитрил. Применение альтернативных де­текторов (например, ИДРС или МС) должно возродить интерес к применению спиртов для разделения белков.

4.7. Лекарственные вещества

4.7.1. Процедуры исследования и скрининга лекарств

Мониторинг примесей в сырье для лекарственных составов и в конечных продук­тах, а также возможных метаболитов этих фармацевтических соединений являет­ся крайне важной, в высокой степени регламентированной областью. Аналитиче­ский метод, однажды принятый для определения лекарств, буквально получает мандат и впоследствии работает вечно. Это вызвано непомерно высокой стоимо­стью аттестации нового метода (не говоря уже о неизбежных вопросах о том, что было сделано неправильно в первом методе). К сожалению, график разработки методов обычно столь сжат, что трудно получить истинно оптимальные процессы (особенно в отношении долговременной надежности). Следовательно, критич­ным является правильное понимание выбора, доступного аналитику.

Крайне важными в этом отношении являются статьи, имеющие дело с большим числом фармацевтических соединений и их удерживанием в метанольных подвиж­ных фазах. В систематическом токсикологическом обзоре по ВЭЖХ рассмотрено свыше 300 соединений [488], которые исследовали на колонке С]₈ (детектор с фо­тодиодной матрицей, X = 190-800 нм с максимумами пиков, приведенными для каждого соединения) при 30 °С с изократической подвижной фазой мета- нол/ТГФ/вода (10 мМ фосфатный буфер с рН 2,6) в объемном отношении 65:5:30. Экстрагировали пробы крови или плазмы и анализировали полученный остаток. Идентификацию пиков проводили по временам удерживания и подтвердили по их УФ спектрам. Этот обзор важен также и потому, что он детально сравнивает, вклю­чает и цитирует результаты 24 других, менее обширных исследований.

Смит и сотр. [489] изучал удерживание 28 основных лекарственных соедине­ний (например, нитразепама, папаверина, кокаина, пропранолола, морфина, ам­фетамина, пролинтана, пипазетата, эфедрина, стрихнина) на кварцевой колонке (А, = 254 нм) с использованием подвижной фазы метанол/вода (по 80 мМ 3-[цикло- гексиламино] -1 -пропансульфоната и 3-[циклогексиламино] -1 -пропансульфоно- вой кислоты до рН 10,0) в объемном отношении 90:10. Вводили по 1 мкл стандар­тных растворов с концентрацией в диапазоне от 40 до 1000 мкг/мл. Для каждого определяемого вещества приведены значения к!, которые в данных условиях ле­жат в диапазоне от 0,3 до 10. Авторы отметили постепенное, но непрерывное сни­жение удерживания в течение работы системы. Найдена значительная пустота в головке колонки. Это вновь подчеркивает тот факт, что основные растворители (рН >7) и кислотные растворители (рН < 2,5) быстро растворяют кварцевый носи­тель. Следует использовать предколонку с сорбентом, подходящим для данной аналитической колонки, чтобы предварительно насытить подвижную фазу по ок­сиду кремния и таким образом защитить аналитическую колонку.