САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Рассмотрим в качестве примера четыре протонных вещества: бензойную кислоту (БК), фенилуксусную кислоту (ФУК), фенилянтарную кислоту (ФЯК) и 4-гидроксибензойную кислоту (40Н). Для данного метода оптимизации полезно знание величин рК_я каждого из веществ. Эти величины составляют [68]: 4,20 для БК, 4,58 для 40Н, 4,31 для ФУК и 3,78/5,55 для ФЯК (двухосновная кислота). рН подвижной фазы (по крайней мере, водного ее компонента) выбирают таким, чтобы диапазон значений рН покрывал минимум на ±1 крайние значения рАГ_а (в данном случае от 1,7 до 6,9). В табл. 2.2 перечислены значения к!, полученные при каждом рН, а затем рассчитанные отношения к[1к'₂. Заметьте, что эти отно­шения рассчитаны таким образом, чтобы величина к[ в строке была больше, чем к2, т. е. чтобы первое отношение к[1к'_г было > 1 (т. е. вещество 1 удерживалось лучше, чем вещество 2). Это не означает, что отношение будет > 1 во всем экспе­риментальном диапазоне рН. Действительно, в табл. 2.2 представлены два слу­чая, когда отношение становится < 1. Когда это происходит, то наблюдается об­ращение порядка элюирования.

На рис. 2.10 построен график зависимости а от рН в диапазоне от 1,7 до 5,6. Часть графика под составной кривой (т. е. наименьшее значение а при любых рН) показывает, что ни одна пара определяемых веществ не элюируется совме­стно при этих условиях, так как а ф 1. Хорошее разрешение часто коррелирует с величинами а большими, чем 1,2. В этом примере наилучшее разрешение на­блюдается при рН 4,1, для которого значение а равно 1,55.

Здесь следует указать на два соображения. Во-первых, максимальное значе­ние а не обязательно соответствует оптимальным рабочим условиям. В сущно­сти, а есть лишь мера разделения, но не общего времени элюирования. Таким образом, работа при рН 4,1 может потребовать 25 мин для полного элюирова­ния, тогда как работа при рН 2,1 (а = 1,2) — лишь 15 мин. При проведении боль­шого числа анализов эта разница может оказаться крайне важной.

^а Отношение коэффициентов к, равное к[1к'₂, обычно называют степенью разделения а. ⁶ Заметьте, что начальное отношение (в первой колонке таблицы) всегда рассчитывают так, что­бы в числителе стоял К более удерживаемого соединения (т. е. большее значение к'). Поэтому начальное отношение больше 1.

2.5. Метод «грубой силы»

Метод «грубой силы» не основан на математических функциях или взаимосвязях, алгоритмических итерациях или построении профилей градиента. Это оригиналь­ный классический метод оптимизации. Он очень эффективен для не слишком сложных разделений и зависит от опытности аналитика. Метод также дает воз­можность проводить оптимизацию, если в системе ВЭЖХ не предусмотрен гра­диентный режим работы.