Убрать осадок из хроматографической системы крайне тяжело. Для очистки системы, в которой образовался осадок, готовят подвижную фазу, состав которой идентичен буферной системе за исключением самого буфера. Затем ее прокачивают через систему до достижения равновесия. Затем берут совместимый с системой растворитель, в котором буфер растворим значительно лучше, и прокачивают его через систему при малой объемной скорости потока обычно на протяжении многих часов (или всю ночь, что предпочтительнее). Если использовать достаточный объем (чтобы элюируемый буфер оставался очень разбавленным), то можно вновь выделить израсходованный при этом растворитель. К сожалению, исходные характеристики колонки могут никогда не восстановиться.
Еще более нежной является градиентная система, в которой оба растворителя А и Б имеют различный состав буфера и по мере развития градиента протекает осаждение или расслоение фаз. Если концентрация любого из компонентов подвижной фазы в смесительной камере или в колонке превысит его растворимость, тогда происходит расслоение фаз или образуется осадок. Здесь очень важно помнить, что адсорбированный на носителе поверхностный слой не обязательно идентичен подвижной фазе. Этот слой обычно обогащен теми компонентами подвижной фазы, которые наиболее подобны носителю.
Обратный перевод в раствор осажденной на колонке несмешиваемой жидкой фазы — длительный процесс, но может быть выполнен с использованием «универсального растворителя» (например, ацетона или изопропанола). Как обсуждалось выше, перевод в раствор твердого осадка по меньшей мере затруднителен, а обычно вообще невозможен, особенно если осадок образовался в порах носителя или входной фритты.
Во избежание проблем, связанных с растворимостью, обычно рекомендуется готовить подвижные фазы по крайней мере за день до использования. Таким образом, равновесие устанавливается до применения, и любые процессы разделения фаз можно легко заметить. Отсутствие осадка или нескольких фаз является хорошим показателем того, что приготовлена подходящая для использования смесь.
1.10. Летучесть
Летучесть компонентов подвижной фазы в прошлом не представляла особой хроматографической проблемы. Единственным случаем, когда летучесть играла роль, был начальный этап приготовления растворителя. Чтобы предотвратить попадание пузырьков газа в хроматографическую систему (что в конечном итоге приводило к плачевному результату, когда пузырьки собирались в насосе или детекторе), использовали ряд способов дегазирования растворителя: обработка ультразвуком (обычно 5-10 мин), вакуумирование (приложение вакуума до тех пор, пока растворитель не закипит; конечно, это был мягкий вакуум, так что стеклянный контейнер был вне опасности и не взрывался) и/или продувание инертным газом, например гелием (см. рекомендации производителя). Обзоры этих способов имеются в литературе [14,25]. Независимо от используемого способа, дегазирование растворителя проводится в течение короткого времени непосредственно перед использованием. При уменьшении времени, затраченного на процедуру дегазирования, состав растворителя не изменяется.
|
|
|
АКЦИИ, ПРЕДЛОЖЕНИЯ |
|
Доставка бесплатно! |
Компания «Плазма» предлагает всем новым клиентам бесплатную доставку первого заказа! |
|
| |
НОВОСТИ |
|
15-06-09 |
ООО "ПЛАЗМА" рада сообщить, что с 15 июня 2009 года, появляется новый отдел, теперь мы готовы предоставлять промышленных альпинистов, для работ любой сложности (окраска, мойка, ремонт, реставрация). Все альпинисты имеют соответствующие лицензии. Цены дешевле средних. Звоните, будем рады помочь. |
|
01-06-09 |
ООО "ПЛАЗМА" успешно завершила поставку лакокрасочных материалов для ОАО "РЖД".
Ждем подписания следующего контракта. |
архив новостей...
|
|