САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Таблица предназначена не для представления количественных значений рН из-за упоминавшейся уже изменчивости, а для демонстрации того, насколько си­льно может ожидаемое значение рН отличаться от «измеренного» во всем диапа­зоне рН для различных органических компонентов подвижной фазы. Из этого рас­смотрения можно вынести два заключения. Во-первых, наиболее эффективным буфером будет тот, для которого значение рКа близко к желаемому значению рН. Во-вторых, для буферной подвижной фазы следует приготовигь водный буфер с пропорционально большей концентрацией, так чтобы при разбавлении органиче­ским компонентом получить нужную конечную концентрацию.

Хотя буферы и добавки содержатся в подвижной фазе в очень низкой кон­центрации, чистота их все же очень существенна для правильного функциони­рования хроматографической системы. Пример приведен на рис. 1.5, г. Здесь сравнивали свежий триэтиламин (ТЭА) с хранившимся более года. Заметим, что старый ТЭА имеет сильное поглощение в области 250-280 нм, что указывает, по-видимому, на экстракцию фенольных компонентов из крышки бутыли. Сно­ва уместно напомнить о необходимости обновления реагентов для обеспечения качества и воспроизводимости хроматограмм.

Как отмечалось выше, подвижные фазы ацетонитрил/вода обычно использу­ют в ОФ хроматографии. Вследствие этого приготовление стандартного буфера для подвижной фазы часто включает приготовление, фильтрование и добавле­ние водного фосфатного буферного раствора к ацетонитрилу для получения ра­бочей подвижной фазы. Пара ацетонитрил/водный фосфатный буфер выбрана для иллюстрации следующего аспекта. При объемном отношении ацетонит- рил/фосфатный буфер, близком к 50:50, и концентрации последнего 50 мМ (эта концентрация соответствует однозарядному иону Н₂Р0₄ и уменьшается по мере роста заряда для ионов НР0₄² и Р0₄³ ) образуется осадок. Наиболее серь­езным моментом здесь является тот факт, что образование осадка не происходит сразу. По существу, хроматографист создает прекрасный растворитель для пере­кристаллизации и медленного образования кристаллов. Вследствие этого, по­движную фазу часто начинают использовать раньше, чем беда будет осознана. Позже находят тонкий слой белого осадка, покрывающий дно емкости с раство­рителем. Если осадок есть там, то он имеется и в насосе, где истирает поршень и уплотнения, и во фриттах колонки, где затрудняет поток, и в носителе, где осаж­дается в порах и модифицирует поверхность носителя. Следовательно, состав буфера, концентрация, заряд и состав растворителя — вот ключевые аспекты, требующие рассмотрения при приготовлении подвижной фазы.