САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Соответствующая константа равновесия К_л записывается в виде

(1.5)

Решая уравнения 1.5 для [ГГ], получаем

(1.6)

Из уравнения 1.6 можно легко сделать вывод, что наиболее эффективный буфер, т. е. наиболее способный противодействовать изменению рН, имеет [СН₃СООН] = [СН₃СОО ]. Как следствие, небольшие изменения содержания кис­лоты или основания в растворе дают соответственно небольшие изменения [СН₃СООН]/[СНэСОО ], так что [Н⁴] (ирН) остается постоянным. Заметим также, что при [СНзСООН] = [СН₃СОО ] их отношение равно 1 и [Н⁺] = К_л (рН = рАГ_а). Следовательно, буферные системы составляются из кислот и оснований, значения рК_я которых близки к желаемым значениям рН. В табл. 1.3 перечислены некото­рые основные компоненты, используемые в буферах.

Готовя буферный раствор, помните, что концентрация буфера должна значи­тельно (по меньшей мере в 10 раз) превышать концентрацию кислоты или осно­вания из любого возможного внешнего источника. Чаще всего это не проблема в ВЭЖХ, поскольку в систему вводят очень малый объем анализируемой низко­концентрированной пробы. Помимо этого, буфер должен быть совместим с сис­темой (и растворяться, и не реагировать [кроме как буфер]). Типичная концент­рация буфера меняется от 5 до 200 мМ.

При использовании буферов в подвижных фазах ВЭЖХ очень важно по­мнить о том, что понятие рН, о котором мы обычно говорим, введено для водных растворов. В этих растворах мы имеем дело с гипотетической «чистой» водой с рН ~ 7. Большинство подвижных фаз в ВЭЖХ содержит значительные количе­ства органических компонентов. Поэтому надо помнить, что:

1. Действительное значение рН водно-органического буферного раствора не совпадает с соответствующим рН водного буфера.

2. рН водно-органического буфера, измеренный с помощью рН-электрода, не совпадает со значением, полученным для соответствующего водного буфера.

Что касается пункта 1, рН 0,1 М ацетатного буфера, равный 4,2, не эквива­лентен рН смеси, составленной в объемном отношении 50:50 из метанола и вод­ного 0,2 М ацетатного буфера с рН 4,2. Что касается пункта 2, рН электрод дает отклик на изменение [Н^ь], связанное с изменением в водном слое мембраны стеклянного электрода. Очевидно, что 50%-ный раствор органического раство­рителя окажет колоссальное и изменчивое влияние на работу электрода и полу­ченное «наблюдаемое» рН. Примеры этого приведены в табл. 1.4, где сравнива­ются значения рН 0,1 М водных буферов со значениями для соответствующих растворов вода/ацетонитрил и вода/метанол (например, смесь ацетонитрила с 0,2 М ацетатным водным буфером с рН 2,21 в объемном отношении 50:50).