САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

1.5. Системные пики

Важным результатом работы с подвижными фазами в тех спектральных областях, где фоновая оптическая плотность значительна, является возможное появление больших системных (артефактных) пиков. Системные пики представляют собой зоны, обедненные или обогащенные различными компонентами подвижной фазы, элюируемые из колонки и наблюдаемые на хроматограмме как положите­льные и отрицательные пики (рис. 1.8).

Присутствие системных пиков, их величина и время элюирования зависят от сложной взаимосвязи между основой пробы, объемом введенной пробы, длиной волны детектора, составом подвижной фазы и типом сорбента. Широкое обсуж­дение этого вопроса можно найти в статьях, описывающих проблемы, связан­ные с системными пиками (включая отрицательные пики, которые элюируются вместе с пиками определяемых компонентов) в работах с обращенной фазой [8, 9] и с нормальной фазой [10]. Имеется также полное теоретическое рассмот­рение [11].

Наилучшими способами избежать системных пиков являются следующие: 1) когда это возможно, всегда растворять пробу в подвижной фазе, и 2) работать при длине волны, на которой основа пробы и подвижная фаза имеют малое или нулевое поглощение. Следует отметить, что даже в том случае, когда выполня­ется второе условие, разность показателей преломления между неподходящим раствором пробы и системой растворителей может приводить к «пикам», свя­занным с показателем преломления, или к другим смещениям нулевой линии. Эти «пики» могут элюироваться при любом времени в течение процесса элюи­рования и могут также оказывать сильное мешающее влияние, особенно при ра­боте с высокочувствительным детектором.

1.6. Изменчивость свойств растворителей от партии к партии

Примеры индивидуальных растворителей, приведенные выше, выбраны для ил­люстрации огромной разницы, которая наблюдается между спектрами обычно используемых растворителей, и ограничений, которые связаны со спектральны­ми характеристиками. Однако, в дополнение к различиям между растворителя­ми, представление важных спектральных характеристик растворителей для ВЭЖХ было бы неполным без обсуждения изменчивости свойств этих раство­рителей от партии к партии и ее влияния на хроматографические методы.

Изменения от партии к партии могут проявляться в спектрах растворителей следующим образом: в виде спектрального сдвига и/или в виде спектральных аномалий. При производстве многих партий конкретного растворителя УФ гра­ница прозрачности будет меняться. Например, УФ граница прозрачности для произведенных последовательно партий метанола может измениться от 202 до 205 нм. Для большинства определений это не представляет проблемы. Однако для метода, использующего контроль поглощения определяемого вещества при 205 нм, фоновая оптическая плотность может иметь сдвиг на 0,2. Это показано на спектре поглощения, приведенном на рис. 1.9. Типичная партия метанола с границей прозрачности 202 нм дает оптическую плотность при 205 нм, равную приблизительно 0,84.